Les bactéries à gram positif sont mises en évidence par une technique de coloration appelée coloration de Gram. Les bactéries à gram positif apparaissent alors mauves au microscope. La technique de coloration repose sur les caractéristiques membranaires et de paroi de la bactérie. La coloration au Gram est un facteur déterminant dans la taxinomie (classification) bactérienne.
Des bactéries gram + (Bacillus subtillis).
Après fixation des bactéries sur une lame (deux méthodes possibles : fixation à l'éthanol à 90° ou par passage de la lame dans la flamme) :
La lame est ensuite récupérée, rincée et séchée, puis observée au microscope optique généralement à l'objectif x100 + huile à immersion. Les bactéries gram positif apparaîtront en violet. L'observation de leurs couleurs est généralement accompagnée de descriptions structurelles (ex. bacille ou coque).
Les bactéries gram positif ont une structure qui s'organise en trois grandes parties : (de l'extérieur vers l'intérieur)
La couche de peptidoglycane des bactéries à gram positif est très épaisse contrairement à celle des bactéries à gram négatif, Sa composition varie très légèrement en fonction du genre voire de l’espèce de la bactérie concernée. Elle est principalement formée de plusieurs couches de polymère de N-acétylglucosamine (NAG) et d'acide N-acétylmuramique (NAM) en série alternée. Le peptidoglycane des gram positif est traversé latéralement par de grande chaînes polymérique qui le relie à la membrane plasmique : les acides lipotéichoïques. D’autre chaînes comme les acides téichoïques sont contenus dans le peptidoglycane et assurent sa stabilité.
L'espace périplasmique, beaucoup plus étroit que chez les gram négatif, est un espace de stockage d'enzymes, de nutriments, de protéines, d’ions... Il a beaucoup d'autres fonctions notamment dans certaines étapes de la synthèse de protéine et dans le métabolisme. Il se situe entre la couche de peptidoglycane et la membrane plasmique.
La membrane possède des protéines poreuses aboutissant dans l'espace périplasmique (synthèse de protéine). La membrane plasmique contient de nombreux autres complexes protéiques d'une importance vitale pour la bactérie (comme l'ATP synthase) qui ont des rôles prépondérants dans le métabolisme bactérien.
Les bactéries gram positif sont pour la plupart des germes non exigeants, c'est-à-dire qu'ils se cultivent facilement dans les milieux de base. La plupart des coques sont des grams positif mais de nombreux bacilles sont aussi des gram positif.
La discrimination entre les bactéries à gram positif se fait par la recherche de la catalase.
Sur une lame microscopique propre, déposer une goutte d'eau oxygénée (ou peroxyde d'hydrogène H2O2). Prélever sur un milieu gélosé, la colonie à tester au moyen d'une pipette Pasteur stérile ou d'un ensemenceur métallique et déposer la colonie dans la goutte.
Si on observe un dégagement gazeux (dioxygène), on dit que le résultat est positif, la souche est catalase +. Si on n'observe aucun dégagement gazeux, on dit que le résultat est négatif, le souche est catalase -.