Lucas Pacioli commence ses études à Borgo Sansepolcro puis les poursuit à Venise où il suit les cours de Domenico Bragadino, lecteur public de la République de Venise. Il est en même temps le précepteur des trois fils du marchand vénitien Antonio Rompiasi. Il est à Rome en 1471, auprès de Leon Battista Alberti. Il devient moine vers 1476 dans le couvent franciscain San Francisco della Vigna de Venise. On l'autorise cependant à enseigner les mathématiques. Il sillonne ainsi l'Italie : Pérouse, Zara (l'actuelle Zadar), Florence, Urbino où Guidobaldo da Montefeltro est son élève, Naples. En 1496, Ludovico Sforza l'invite à Milan. C’est là qu’il rencontre Léonard de Vinci avec qui il se lie d’amitié et à qui il enseigne les mathématiques. À la chute de Ludovic le More, en 1499, Luca Pacioli quitte Milan pour Mantoue en compagnie de Léonard de Vinci, comme le rapporte Giorgio Vasari. Il enseigne ensuite les mathématiques à l’Université de Pavie. On le retrouve ensuite à Bologne, puis en 1508 à Venise, où il enseigne les Éléments d'Euclide. Il retourne en 1514 à Rome où il meurt en 1517.