D'une manière générale, le mot séparation désigne une action consistant à séparer quelque chose ou son résultat. Plus particulièrement il est employé dans plusieurs domaines :
- en mathématique, la séparation est un concept de topologie ou de géométrie, lié à la façon de séparer les points ou les parties d'un espace topologique. Voir séparation (mathématiques) ;
- en astronomie, la séparation est l'angle entre deux étoiles d'une étoile double ou multiple mesuré depuis la Terre.
- en chimie, un procédé de séparation est un procédé permettant de transformer un mélange en deux ou plusieurs produits distincts ;
- en physique nucléaire, la séparation isotopique est un procédé permettant de séparer les différents isotopes d'un corps ;
- en imprimerie, la séparation quadrichromique est un procédé consistant à définir séparément l'impression de chaque couleur ;
- en droit public, la séparation de corps ou la séparation de biens sont des dispositions juridiques ;
- en droit constitutionnel, la séparation des pouvoirs est un des fondements de la démocratie.