La tégénaire domestique est solitaire et nocturne. Elle vit sur des toiles en formes d'entonoirs qu'elle refait chaque nuit. Il lui arrive parfois de sortir de sa toile pour chasser si elle est affamée, mais en général elle chasse les proies qui se trouvent sur sa toile, la faisant ainsi sortir de sa toile pour la mordre puis la porter à sa cachette pour lui injecter des enzymes (qui servent à ramolir la proie, car les araignées ne peuvent pas mâcher) et la dévorer. Lorsqu'un mâle cherche à s'accoupler, il touche la toile de la femelle à l'aide d'une de ses pattes en faisant un rythme régulier ; indiquant ainsi à la femelle qu'il n'est pas une proie. Si la femelle sort, il prend la fuite, mais si elle ne sort pas, il rentre et lui injecte du sperme à l'aide de ses pédipales (les sortes de petites pattes à l'avant).
Après l'accouplement, il y a 3 possibilités:
- la femelle attaque le mâle (le plus souvent) ;
- le mâle part de la toile sans se faire attaquer (assez rare) ;
- la femelle accepte le mâle et ils vivent en couple (extrêmement rare).
Après quelques jours de gestation, la femelle pond des centaines d'œufs qu'elle protegera. Lors de l'éclosion, les petits mangent leur mère. Une femelle peut vivre 5 ans.