La différenciation pédagogique est une action du pédagogue qui, sur la base d’une connaissance des préalables et des caractéristiques d’un ou de plusieurs élèves, de formules pédagogiques et d’interventions diversifiées, du programme de formation (objet d'apprentissage) et de l’environnement d’apprentissage, tend à harmoniser ces différentes composantes d’une situation pédagogique ainsi que les relations entre elles, dans le but de favoriser l’apprentissage.
En d’autres termes, différencier signifie savoir analyser et ajuster sa pratique de même que l’environnement d’apprentissage de façon à tenir compte des préalables et caractéristiques d’un ou de plusieurs élèves au regard d’un objet d’apprentissage particulier. Elle se distingue ainsi des classes standardisant l'apprentissage.
Le Ministère de l'Éducation, du Loisir et du Sport du Québec (MELS) suggère qu'il existe trois niveaux de différenciation pédagogique :