Pipette automatique - Définition
La liste des auteurs de cet article est disponible ici.
Introduction
Une pipette automatique ou micropipette ou pipetteur automatique est un système de pipettage de précision utilisé entre autres en chimie analytique et en biologie moléculaire. Parmi les marques, citons Pipetman® (marque déposée de Gilson®) et Finnpipet®.
Description
Ce sont des systèmes actionnant des pistons. La modification de la longueur de la colonne d'air à l'intérieur de l'appareil permet d'aspirer ou de chasser des volumes de liquides avec une grande précision.
Une molette permet à l'utilisateur de règler le volume à prélever, à l'aide d'un indicateur à chiffres.
Il existe généralement une gamme de modèles selon le volume à pipetter et la précision du prélèvement à effectuer :
- P5000 : permet de pipetter jusqu'à 5 ml de solution ;
- P1000 : permet de pipetter de 200 à 1 000 µl de solution ;
- P200 : permet de pipetter de 20 à 200 µl ;
- P20 : permet de pipetter de 10 à 20 µl ;
- P10 : permet de pipetter de 0.5 à 10 µl.
Pointes
Il est nécessaire d'avoir des embouts (ou "pointes" ou "cônes") qui soient adaptés à la micropipette utilisée. Ces embouts doivent être le plus effilés possible, notamment pour les petits volumes, afin de mieux voir le volume prélevé. Ils sont généralement disposés dans des boites stérilisables, munies d'un plateau percé, où l'on les met.
Il existe des embouts munis d'un filtre de coton. Ils permettent d'éviter la contamination pouvant provenir du plastique de la pipette ou de la colonne d'air.
Il existe aussi des boîtes en paquet stérile déjà remplies d'embouts. Ces boîtes sont jetables.
On prélève un embout simplement en appliquant le bout de la micropipette dans le col de l'embout. En appuyant un peu, l'embout s'enfonce et peut être retiré de la boîte.
Un éjecteur de cônes permet de jeter l'embout souillé de la micropipette sans se servir de ses mains.
Réglage
Une petite clé permet de serrer ou desserrer une vis modifiant la longueur de la colonne d'air et permet de régler la micropipette.
Les pipettes automatiques doivent être régulièrement calibrées pour que le volume qu'elles prélèvent reste précis.
Utilisation
On commence par règler le volume à prélever sans dépasser la portée de la pipette : c'est-à-dire la tranche de volumes pour laquelle elle est conçue.
Par exemple, une "P20" (10 µl à 20 µl) ne doit pas être réglée à moins de 10 µl ou à plus de 20 µl. C'est aussi entre ces deux valeurs que la précision est la meilleure.
Pour pipetter, on tient la pipette automatique par le corps avec les quatre doigts de la main droite (si on est droitier) et le pouce sert à actionner le piston ou l'éjecteur de cônes.
Les pipettes automatiques sont dotées de deux crans en fonction de la force qu'on applique sur le piston :
- le premier permet d'aspirer le liquide avec la bonne pression correspondant au volume choisi ;
- le second permet l'éjection du liquide prélevé pour que rien ne reste dans le cône. En effet, un liquide visqueux (chargé par exemple en protéines ou acides nucléiques) a tendance à adhérer aux parois.
Il faut prendre garde à ne surtout pas prélever avec le second cran (c'est-à-dire dépasser le premier cran et atteindre le second), car dans ce cas un volume beaucoup trop important est aspiré, de plus le liquide est susceptible d'entrer dans la mécanique de la pipette et de l'endommager.
Lorsque l'on cherche à faire des prélèvements précis, il est important d'immerger le cône le moins possible pour éviter que du liquide n'adhère à l'extérieur du cône.
On se sert de la main gauche pour tenir, ouvrir ou fermer les microtubes.
