Spectrophotomètre - Définition
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En biologie
- Le spectrophotomètre est utilisé lors de la réalisation du test MTT.
- En biologie moléculaire, il est utilisé lors de l'extraction de l'ADN, pour quantifier l'ADN et déterminer sa pureté. On utilise la longueur d'onde 260 nm qui est la zone d'absorbance maximale des acides nucléiques. Une seconde mesure à 280 nm permet de contrôler la pureté de l'extraction, à savoir la présence de protéines résiduelles dans la solution d'ADN. La concentration d'ADN peut-être calculée à partir de la mesure à 260 nm en utilisant un facteur de corrélation :
* ADN double-brin: 1 Abs = 50ng/µl * ADN simple-brin: * ARN:1 Abs = 40ng/µl - En biochimie, il est utilisé lors de la purification de protéines, pour les quantifier (longueur d'onde 280 nm) et déterminer leur niveau de pureté (longueur d'onde 260 nm.
Utilisation
En physique
L'analyse de la lumière permet de déterminer les composants chimiques à l'origine de l'émission lumineuse : par exemple la présence de composés chimiques des étoiles.
En médecine
L'analyse cinétique de différentes enzymes sanguines, dosage de la phosphatase alcaline : cholestase, lactate déshydrogénase : infarctus du myocarde, hémolyse.
Dans les industries graphiques
Il permet de mesurer les couleurs afin de calibrer des périphériques de sorties tels que les traceurs.
En chimie
L'analyse de l'absorption des solutions permet le dosage de ces solutions selon la Loi de Beer-Lambert (la concentration est proportionnelle au logarithme de l'absorption lumineuse). Il y a donc relation directe entre la quantité de lumière absorbée et la concentration en composé chimique de la solution. Le suivi dans le temps de l'absorption est une méthode de caractérisation de la vitesse de réactions chimiques (cinétique).
