L'orthonitrophényl-β-D-galactopyrannoside (ONPG) est un hétéroside. L'aglycone est l'orthonitrophénol, l'ose est le galactose.
Son hydrolyse par une β-galactosidase libère du galactose et de l'orthonitrophénol (ONP), de couleur jaune en milieu basique.
En microbiologie ou bactériologie, l'apparition de la couleur jaune est à la base d'un test permettant la recherche de la β-galactosidase qui catalyse la réaction suivante :
ONPG (incolore) -----------> ONP(jaune) + galactose
La β-galactosidase fait partie de l'opéron lactose, décrit pour la première fois par le prix Nobel de médecine français Jacques Monod.