Le cypripède royal habite tout l’est de l’Amérique du Nord. A l’ouest, il croit jusqu’en Saskatchewan et au Dakota du Nord et jusqu’en Arkansas au sud.
Il est largement distribué et de nombreuses grandes populations de plus de 1000 individus ont été dénombrées. La majorité des populations sont beaucoup plus restreintes et comptent entre 10 et 100 individus.
Le nombre de plants de Cypripedium reginae tend à diminuer depuis quelques années, surtout dans les régions les plus au sud de sa distribution.
La présence d’une très grande population de cerfs de Virginie est une des causes de la disparition du cypripède royal dans son habitat. En effet, les cerfs de Virginie broutent les cypripèdes qui ne peuvent alors plus produire de graines.