Le visiteur suit un parcours de 500 mètres. Il reçoit une première initiation géographique dans l'écosphère. Après avoir passé un premier sas ou écotransit, destiné à préserver les écarts de température, il pénètre dans la forêt tropicale isolée par une structure de verre pour assurer une humidité de 75 % et une température grimpant jusqu'à 28 °C durant la journée. L'écotransit laurentien donne ensuite accès à la forêt laurentienne, inspirée par les paysages montagneux de la Mauricie, au Canada. Un nouvel écotransit assure une très nette baisse de température avant le Saint-Laurent marin doté d'un bassin géant. Le dernier écotransit donne accès à un couloir traversant l'Arctique et l'Antarctique. Des animations sont organisées au carrefour de l'environnement. Les enfants peuvent jouer les explorateurs à l'espace Naturalia.
Environ 950 000 visiteurs visitent le biodôme annuellement.