La majorité des médecins rejettent toutes les propositions de toutes les branches de l'iridologie et la déclare comme pseudo-science, voire charlatanisme. Les iridologues sont rarement des médecins. l'iridologie est seulement étudiée dans des institutions privées, elle n'est pas enseignée dans les écoles de médecine.
Les critiques, y compris la plupart des praticiens de la médecine, rejettent l'iridologie car les études publiées n'ont trouvées aucune preuve de ses assertions. Les données cliniques ne supportent pas la corrélation entre une maladie présente dans le corps et des changements observables dans l'iris. Dans des expériences contrôlées, des praticiens de l'iridologie n'ont pas statistiquement mieux fait pour déterminer la présence d'une maladie ou d'une condition par l'observation de l'iris que par pure chance.
Il a été souligné que la prémisse de l'iridologie est en contradiction avec l'idée que l'iris ne subit pas de changements durant la vie d'un individu. L'iris est une texture caractéristique phénotypique qui se développe durant la gestation et reste inchangée après la naissance. Il n'y a aucune preuve de changements dans la structure de l'iris autre que les variations de pigmentation dans la première année de vie, et d'éventuelles taches et variations causées par le traitement du glaucome. Cette stabilité de structure de l'iris est d'ailleurs à la base de la reconnaissance de l'iris à des fins d'identification.
Les recherches contrôlées de l'iridologie n'ont montré que des résultats entièrement négatifs. Tous les tests rigoureux en double aveugle n'ont trouvé aucun résultat statistiquement significatif à ses propositions.
Dans une étude publiée dans le Journal of the American Medical Association (Simon et al., 1979), trois iridologues ont identifié à tort une maladie rénale à partir de photographies de l'iris et se sont trouvés souvent en désaccord entre eux. Les chercheurs ont conclu: "l'iridologie n'est ni sélective ni spécifique, et la probabilité de détection correcte n'était statistiquement pas meilleur que par chance."
Une autre étude a été publiée dans le British Medical Journal (Knipschild, 1988). Paul Knipschild MD, de l'Université du Limbourg à Maastricht, a sélectionné 39 patients qui devaient avoir leur vésicule biliaire enlevée le lendemain, en raison de soupçons de présence de calculs biliaires. Il a également sélectionné un groupe de personnes n'ayant pas de problèmes de vésicule biliaire pour agir comme groupe de contrôle. Un groupe de 5 iridologues a ensuite examiné une série de diapositives des iris des deux groupes. Les iridologues n'ont pas été en mesure d'identifier correctement les patients ayant des problèmes vésicule biliaire de ceux n'en ayant pas. Par exemple, l'un des iridologues a diagnostiqué 49% des patients avec calcul biliaire et qui en avaient et 51% de ceux n'en ayant pas. Ce qui est la même proportion que l'on aurait obtenu par un tirage au hasard. Dr Knipschild a conclu: «Cette étude a montré que iridologie n'est pas un bon outil de diagnostic." Les iridologues se sont défendu en attaquant la méthodologie de l'étude.
Edzard Ernst a dit en 2000: "Est-ce qu'iridologie fonctionne? [...] Cette stratégie de recherche a abouti à 77 publications sur le thème de l'iridologie. [...] Toutes les études non contrôlées et plusieurs des expériences non masquées ont suggéré que l'iridologie puisse être une outil de diagnostic valable. La discussion qui suit fait référence à 4 évaluations contrôlées et masquées de la validité du diagnostic par l'iridologie. [...] En conclusion, peu d'études contrôlées avec évaluation masquée sur la validité du diagnostic ont été publiées. Aucune n'a trouvé un bénéfice quelconque de l'iridologie.
Une étude publiée en 2005 a testé si l'iridologie pourrait être utile dans le diagnostic de formes communes de cancer. Un praticien expérimenté a examiné les yeux de 68 personnes ayant un diagnostic prouvé de cancer du sein, de l'ovaire, de l'utérus, de la prostate, ou du colon, et 42 pour lesquels il n'y avait pas de preuve médicale de cancer. Il a été demandé au praticien, qui n'était pas au courant de leur sexe ou de leur état médical, de proposer un maximum de cinq diagnostics pour chaque personne, et ses résultats ont ensuite été comparés à chaque diagnostic médical connu. L'iridologue a correctement diagnostiqué le cancer dans seulement 3 des 68 cas.